Klinikadan oldingi tadqiqotlarda itlar va noinsoniy primatlarda klinik patologiyani talqin qilish

Itlar vanoinsoniy primatlar (NHPs), xususan Beagle itlari va sinomolgus yoki rezus makakalar klinikagacha dori ishlab chiqarishda muhim yirik hayvonlar modellaridir. Ularning odamlarga fiziologik o'xshashligi xavfsizlik, farmakologiya va biomarkerlarni baholash uchun tarjima qiymatini ta'minlaydi.

Kemiruvchilardan farqli o'laroq, yirik hayvonlar bir vaqtning o'zida qon namunalarini qayta-qayta olish va katta miqdordagi namunalarni o'z ichiga oladi.farmakokinetik (PK), toksikokinetik (TK), va klinik patologiyani baholash. Biroq, bu turlardagi klinik patologiya ma'lumotlarini sharhlash biologik o'zgaruvchanlik, tadqiqot dizayni, hayvonlarning kelib chiqishi va eksperimental protseduralar bilan aralashadi. Haqiqiy sinov maqolasi{2}} bilan bog'liq toksiklikni fiziologik siljish yoki protsessual artefaktlardan ajratish uchun bu o'zgaruvchilarni har tomonlama tushunish kerak.

Katta hayvonlarni o'rganishda kohort o'lchamlari axloqiy va amaliy cheklovlar tufayli cheklangan. Shunday qilib,-dozadan oldingi dastlabki ma'lumotlar muhim ahamiyatga ega. Bir nechta dozani oldindan baholash- tadqiqotchilarga quyidagilarga imkon beradi:

• Har bir hayvonni o'zining bo'ylama nazorati sifatida o'rnating.
• Individual biologik o'zgaruvchanlikni aniqlash.
• Randomizatsiyadan oldin nosog'lom hayvonlarni yoki nosog'lom hayvonlarni aniqlang va chiqarib tashlang.
• Asosiy fiziologiyadan-stressga olib keladigan munosabatni farqlang.

Maqsadli kemiruvchilar yoki itlar bilan solishtirganda, NHPlarda individual o'zgarishlar ayniqsa yaqqol namoyon bo'ladi. Dastlabki anomaliyalar ko'pincha o'zgaruvchan eritrotsitlar parametrlarini, jigar fermentlarining sporadik ko'tarilishini yoki atipik protein profillarini o'z ichiga oladi. Agar ushbu boshlang'ich o'zgarishlar kutilgan farmakologik maqsad yoki sinov maqolasining toksikologik profili bilan mos tushsa,-dozadan oldingi skrining tekshiruvi noto'g'ri ijobiy talqinlarning oldini olishning asosiy mexanizmi bo'lib xizmat qiladi.

Farmakokinetik profilni aniqlash uchun tez-tez flebotomiya iatrogenik gematologik siljishlarni keltirib chiqarishi mumkin. Yuqori-chastotali yoki yuqori{2}}qon to'planishi ko'pincha quyidagi holatlarning pasayishiga olib keladi:

• Qizil qon hujayralari (RBC) soni
• Gemoglobin (Hgb) kontsentratsiyasi
• Gematokrit (Hct)
• Umumiy protein va albumin (gemodilyutsiya tufayli)

Agar suyak iligi funktsiyasi saqlanib qolsa, bu mikrositik yoki normositar o'zgarishlar odatda kompensatsion retikulotsitoz bilan birga keladi. Shuning uchun eritron parametrlarining engil pasayishi tadqiqot davomida olingan umumiy qon hajmi bilan oʻzaro{1}}oʻzaro bogʻlanishi kerak.

NHP protokollari cheklash, tasvirlash yoki invaziv namuna olish uchun muntazam ravishda behushlikni talab qiladi. Anesteziyani tanlash va davomiyligi bevosita klinik patologiya ko'rsatkichlariga ta'sir qiladi. Anesteziya qilingan hayvonlarda tez-tez leykotsitlar taqsimoti o'zgargan va elektrolitlar profili ongli, qo'lda cheklangan kogortalarga nisbatan o'zgargan. Bundan tashqari, yotgan holatda va mushak ichiga anestezik in'ektsiyalari subklinik mushaklarning shikastlanishiga olib kelishi mumkin, bu esa kreatin kinazning (CK) sezilarli darajada oshishiga olib keladi. Izchil namuna olish texnikasi va standartlashtirilgan anestetik protokollar barcha tadqiqot bosqichlarida majburiydir.

Qattiq nazoratni talab qiladigan qo'shimcha tadqiqot dizayni o'zgaruvchilari quyidagilarni o'z ichiga oladi:

• Hayvonlarning yoshi va rivojlanish bosqichi
• Ro'za muddati va yig'ishga nisbatan vaqt
• Kogorta ichida namuna olish tartibi
• Boshqarish yo'nalishi va tezligi
• Eksperimental muolajalarni birlashtirish (masalan, jarrohlik dozalash, doimiy infuziyalar)

Itlar va NHPlar kemiruvchilarga qaraganda ko'proq eritrotsitlar umriga ega bo'lib, anemiya rivojlanishining kinetikasini va ilik tiklanishini o'zgartiradi. O'tkir qon yo'qotishdan so'ng, yirik hayvonlarda retikulotsitlar darajasi pastroq va asta-sekin regenerativ reaktsiya namoyon bo'ladi.

Makakalarda eritrotsitlarning asosiy xarakteristikalari (masalan, o'rtacha korpuskulyar hajm) geografik kelib chiqishi bilan bog'liq (masalan, Xitoy va Kambodja va Mavrikiya sinomolgusi maymunlari). Bitta geografik manbadan hayvonlardan foydalanish asosiy shovqinni kamaytiradi. Bundan tashqari, subklinik fon patogenlari (masalan, gemoparazitlar yoki yashirin virusli infektsiyalar) eritropoezni bostirishi mumkin va karantin vaqtida tekshirilishi kerak.

Leykotsitlar profili turlarga-o'ziga xosdir. Itlar neytrofillar-dominant, sog'lom NHPlar esa muvozanatliroq yoki limfotsitlar-dominant taqsimotga ega. Ushbu asosiy farqlar tizimli yallig'lanish paytida aniq namoyon bo'lishini belgilaydi.

Bundan tashqari, jismoniy cheklash, yangi muhit yoki qo'rquv katekolamin va glyukokortikoidlarning tez chiqarilishini keltirib chiqaradi. Ushbu stress reaktsiyasi vaqtinchalik neytrofiliya va limfopeniya sifatida namoyon bo'ladigan marginal hovuz mobilizatsiyasini keltirib chiqaradi. NHPlar stress bilan kurashishga juda sezgir bo'lganligi sababli, leykotsitlar sonining-o'zaro bog'liq klinik belgilari yoki to'qimalar yallig'lanishining gistopatologik dalillari-bo'lmaganida alohida o'zgarishlarni ehtiyotkorlik bilan talqin qilish kerak.

Koagulyatsiya kinetikasi turlarga qarab farq qiladi. Boshlang'ich protrombin vaqti (PT) itlarda tabiatan odamlarnikiga qaraganda qisqaroq va idiosinkratik omillarning etishmasligi alohida itlarda dori-darmonlar bilan bog'liq bo'lmagan{2}}izolyatsiyalangan PT uzayishiga olib kelishi mumkin. NHP tadqiqotlarida faollashtirilgan qisman tromboplastin vaqti (APTT) tahlillari reagentlar partiyasining o'zgaruvchanligiga va namunani qayta ishlashga (masalan, yig'ish paytida qisman ivish) juda sezgir. Agar koagulyatsion kaskadi sinov maqolasida ma'lum bo'lgan maqsad bo'lsa, qat'iy bazaviy muvofiqlik va bir xil reagent lotlari juda muhimdir.

Alanin aminotransferaza (ALT) gepatotsellyulyar oqish uchun standart biomarkerdir. Yosh{1}}bigl itlarida asosiy ALT diapazonlari tor bo'lib,-jigarda aniq, davolash natijasida kelib chiqqan o'zgarishlarni aniqlashga imkon beradi. Aksincha, eski itlar va NHPlar kengroq fiziologik o'zgarishlarni namoyish etadilar.

Makakalarda jigar fonidagi oʻzgarishlar yoki subklinik virusli alevlenmelar tufayli koʻpincha vaqtinchalik, oʻz-oʻzidan cheklanadigan ALT keskinliklari namoyon boʻladi. Shunday qilib, jigar fermentlarining bir-ko'tarilishi bir vaqtda biomarkerlar (masalan, aspartat aminotransferaza, umumiy o't kislotalari), funktsional tahlillar va gistopatologik baholash orqali tasdiqlashni talab qiladi.

Ishqoriy fosfataza (ALP) va gamma{0}}glutamil transferaza (GGT) gepatobiliar yoki xolestatik kasallikning ko'rsatkichi bo'lib xizmat qiladi. ALP itlarda kolestazga juda sezgir bo'lsa-da, u NHPlarda suyak va ichak izoenzimlarining sezilarli hissasi tufayli kamroq o'ziga xosdir, ayniqsa o'sayotgan hayvonlarda. GGT ko'pincha NHP modellarida yanada ishonchli biliar marker hisoblanadi.

Qon karbamid azoti (BUN) va sarum kreatinini buyrak etishmovchiligining dastlabki-bosqichlariga befarq bo'lishiga qaramay, glomerulyar filtratsiyaning standart ko'rsatkichlari bo'lib qolmoqda. Itlar bu tahlilchilar uchun nisbatan tor fiziologik diapazonlarni saqlab, engil buyrak o'zgarishlarini aniqlashni soddalashtiradi. Bundan farqli o'laroq, NHPlar keng bazaviy diapazonni taqdim etadi, bu esa nozik siljishlarni tavsiflashni qiyinlashtiradi.

BUNga protein katabolizmi, ovqatlanish va hidratsiya holati ta'sir qilganligi sababli, uni kreatinin bilan bir qatorda talqin qilish kerak. Siydik tahlili muhim kontekstni taʼminlaydi, lekin yirik hayvonlardan namunalar olish-koʻpincha bir kecha-kunduzda idish yigʻish-bugʻlanish, najas bilan ifloslanish yoki hujayra degradatsiyasi xavfini keltirib chiqaradi. Nefrotoksiklik asosiy tashvish bo'lsa, ultratovush tekshiruvi-boshqariladigan sistoskopiya yoki maxsus metabolik qafas tavsiya etiladi.

Kreatin kinaz (CK) ko'tarilishi NHP tadqiqotlarida keng tarqalgan. Ular ko'pincha jismoniy ushlash, cheklash, mushak ichiga in'ektsiya qilish yoki tizimli sinov maqolasining zaharliligidan ko'ra behushlik ostida uzoq vaqt yotqizish orqali amalga oshiriladi. Noto'g'ri talqin qilishning oldini olish uchun izolyatsiya qilingan CK piklari quyidagilarga nisbatan baholanishi kerak:

• Stressli hodisalar yoki in'ektsiyalarga xronologik yaqinlik
• Davolash guruhlari boʻyicha{0}}dozaga bogʻliqlikni aniqlang
• Aniqroq to'qima belgilarini birgalikda faollashtirish
• Aspartat aminotransferaza (AST) va laktat dehidrogenaza (LDH) ning bir vaqtda o'zgarishi

Kardiotoksisiteni baholash uchun yurak troponinlaridan (I yoki T) foydalanish kerak, chunki ular itlarda ham, NHPlarda ham an'anaviy fermentativ belgilarga nisbatan yuqori kardio o'ziga xoslikni ta'minlaydi.

NHPlarda glyukoza va lipid metabolizmi atrof-muhitning stress omillariga va dietani o'zgartirishga juda sezgir. Epinefrinning chiqarilishi-ni muntazam ravishda ishlatish tez glikogenolizni keltirib chiqaradi, natijada vaqtinchalik giperglikemiya paydo bo'ladi. Oziqlantirish jadvali, shuningdek, sarum triglitseridlari va xolesterinning sezilarli o'zgarishiga olib keladi.

NHPlar, shuningdek, kemiruvchilarga qaraganda yuqori va o'zgaruvchan asosiy zardob oqsili kontsentratsiyasini ko'rsatadi. Albomin va globulin fraksiyalaridagi o‘zgarishlar ko‘pincha organlarning bevosita toksikligini emas,-o‘tkir{2}}o‘ziga xos bo‘lmagan yallig‘lanish jarayonlari, subklinik infektsiyalar yoki o‘zgargan oziqlanish holatini aks ettiradi.

Qon zardobidagi elektrolitlar kontsentratsiyasi, xususan, natriy, kaliy va xlorid gidratatsiya holati, anesteziyadan kelib chiqadigan nafas olish depressiyasi- yoki namuna gemolizidan kelib chiqqan kislota{0} asos muvozanati tufayli NHPlarda tez o'zgarishlarga duchor bo'ladi.

Umumiy kaltsiy kontsentratsiyasi qon zardobidagi albumin bilan bevosita bog'lanadi. Binobarin, umumiy kaltsiydagi o'zgarishlar albumin darajasi uchun matematik yoki fiziologik jihatdan tuzatilishi kerak; umumiy kaltsiydagi o'zgarishlar, funktsional, ionlashtirilgan kaltsiy fraktsiyasining biologik jihatdan tegishli siljishini ko'rsatmaydi.

Itlar va noinsoniy primatlardagi klinik patologiya ma'lumotlarini talqin qilish transport vositalari va davolash guruhlari o'rtasidagi standart statistik taqqoslashlardan tashqariga chiqadi. Biologik o'zgaruvchanlik, asosiy siljish, flebotomiya artefaktlari, behushlik va stressni davolash ko'pincha chalkash ma'lumotlarni keltirib chiqaradi.

Xavfsizlikni aniq baholash klinik patologiya parametrlarining tadqiqot dizayni parametrlari, real{0}}vaqtdagi klinik kuzatuvlar, farmakokinetik taʼsir qilish maʼlumotlari va aniq gistopatologik natijalar bilan yaxlit integratsiyalashuviga asoslanadi. Klinikadan oldingi xulosalarni inson xavfini toʻgʻri baholashga aylantirish uchun ushbu maʼlumotlar toʻplamiga qatʼiy va oʻziga xos{2}}oʻziga xos yondashuv zarur.

Prisys Biotech bilan bog'laning

Hall, RL va Everds, NE (2003). Itlar va noinsoniy primatlarning klinik patologiyasini talqin qilishga ta'sir qiluvchi omillar.Toksikologik patologiya, 31(1_qo‘shimcha), 6-10. DOI: 10.1080/01926230390174878